納米混懸劑粒徑控制解決方案

1.  引言

納米混懸劑（nanosuspension）是指用少量表面活性劑(surfactant)為穩(wěn)定劑將難溶性固體純藥物以微粒狀態(tài)分散于分散介質(zhì)中形成的非均相膠體分散體系的液體制劑。其粒徑分布在100-1000nm之間，納米混懸劑作為一種制劑技術(shù)能提高藥物的溶解度和生物利用度，不僅適用于水難溶性化合物，同時(shí)適用于油難溶的化合物，為解決難溶性藥物制劑的制備提供了新的思路和方法。

目前，納米混懸劑主要的給藥途徑是口服給藥、注射給藥、吸入給藥等。口服給藥的藥物粒徑小，比表面積大，載藥量高，能增加藥物吸收速率，提高生物利用度，對(duì)黏膜的黏附性較強(qiáng)，可延長(zhǎng)胃腸道滯留時(shí)間。注射給藥的藥物載藥量高，表面活性劑含量較少，安全性較高，粒徑較小避免阻塞毛細(xì)血管，避免了首過(guò)代謝，且可靶位給藥。吸入給藥的藥物粒徑小，有較強(qiáng)的生物黏附性，對(duì)肺泡巨噬細(xì)胞靶向給藥，增加呼吸道的藥物吸收。

目前國(guó)內(nèi)外用于制備水不溶性藥物的納米混懸劑主要采用“bottom-up"與 “top-down"的方法。“bottom-up"即自下而上，是指從藥物分子水平組建納米粒子，由分子聚集成長(zhǎng)為納米級(jí)顆粒的方法。“top-down"即自上而下，是將粒徑較大的粒子通過(guò)機(jī)械力的作用破壞成小顆粒的方法。主要包括高壓均質(zhì)法（根據(jù)原理又分為微射流均質(zhì)法和閥式均質(zhì)法）和研磨法以及兩種方法聯(lián)用技術(shù)。

本文采用意大利PSI微射流均質(zhì)機(jī)PSI-20制備納米混懸劑，搭配美國(guó)PSS粒度儀公司的Nicomp Z3000和AccuSizer A7000AD分別對(duì)平均粒徑和尾端大顆粒進(jìn)行檢測(cè)，并使用德國(guó)LUM公司的LumiSizer對(duì)穩(wěn)定性進(jìn)行分析，對(duì)納米懸浮劑進(jìn)行粒度控制及表征分析。

2.  制備及表征儀器參數(shù)

微射流均質(zhì)機(jī)制備參數(shù)：

壓力：1500bar、 Y型腔：75μm、 實(shí)時(shí)流速：18.2L/H(≈303mL/min)；均質(zhì)時(shí)間：1.5h

納米粒度儀表征參數(shù)：

粒徑：測(cè)試時(shí)間：3min、溫度：23℃、折光率：1.333、粘度：0.933CP；

多功能自動(dòng)計(jì)數(shù)粒度分析儀表征參數(shù)：

target：3000顆/mL 、 測(cè)量時(shí)間：120S、 測(cè)試下限：500nm；

穩(wěn)定性分析儀表征參數(shù)：

轉(zhuǎn)速：4000轉(zhuǎn)、 掃描間隔：10s、掃描次數(shù)：1000次、溫度：25℃；光源波長(zhǎng)：近紅外870nm

3.  結(jié)果分析

平均粒徑及Zeta電位檢測(cè)結(jié)果

樣品名稱(chēng)	MMD	平均光強(qiáng)粒徑（INTENSITY-WT）Gaussian分布
原液	2476.67nm
均質(zhì)1.5h	470.94nm
說(shuō)明	譜圖為高斯分布,展示了體系粒徑分布情況，橫坐標(biāo)為粒徑，縱坐標(biāo)為光強(qiáng)權(quán)重。另外可查看PI值、卡方值、峰寬窄、累積分布及占比等數(shù)據(jù)。
粒徑分布疊加圖
說(shuō)明	粒徑分布疊加譜圖分別是原液(青)，均質(zhì)10min(藍(lán))，均質(zhì)20min（綠），均質(zhì)30min(紫)，均質(zhì)1h(黃)，均質(zhì)1.5h(黑)。可以看到隨著均質(zhì)粒徑逐漸變小（向左遷移），同時(shí)分布越來(lái)越窄。

尾端大顆粒分布檢測(cè)結(jié)果

樣品名稱(chēng)	CV	數(shù)量徑分布譜圖
原液	61.7%
均質(zhì)1.5h	25.3%
說(shuō)明	譜圖縱坐標(biāo)為濃度（顆/mL），橫坐標(biāo)為粒徑（μm）。 通過(guò)SPOS技術(shù)一顆顆數(shù)出來(lái)＞500nm以上的顆粒數(shù)量（自動(dòng)稀釋后換算濃度）。從而定量分析均質(zhì)后大顆粒的變化趨勢(shì)。
尾端大顆粒疊加圖
說(shuō)明	尾端顆粒分布疊加譜圖則可以更清晰展示出隨著均質(zhì)，大顆粒逐漸消失的過(guò)程，尤其是均質(zhì)了1.5h之后，基本不可見(jiàn)2μm以上的大顆粒存在。結(jié)合數(shù)據(jù)可知，3μm以上的顆粒去除率達(dá)到了99.7%。

LUM穩(wěn)定性測(cè)試結(jié)果

樣品名稱(chēng)	Instability Index	穩(wěn)定性指紋圖譜
原液	0.962
均質(zhì)1.5h	0.940
說(shuō)明	譜圖橫坐標(biāo)為離心管距離中心的距離（mm），縱坐標(biāo)為透光率(%)。 通過(guò)時(shí)間空間消光技術(shù)（STEP）得到的不同空間（裝樣位置），不同時(shí)間下的透光譜圖。 通過(guò)譜圖可以看出，紅色為初始譜線，綠色為結(jié)束譜線；每間隔10s時(shí)間采集一條譜線。從譜圖中看出，隨著時(shí)間進(jìn)行，左側(cè)透光率增加（樣品管頂部，距離離心中心距離近），右側(cè)透光率降低（樣品管底部，距離離心中心距離遠(yuǎn)）。從譜圖變化看，這是典型的沉降過(guò)程，隨著沉降的進(jìn)行，樣品管頂部顆粒濃度越來(lái)越低，則透光率越來(lái)越高；而樣品管底部顆粒濃度越來(lái)越高，則透光率越低。 不穩(wěn)定性指數(shù)越高，說(shuō)明該樣品在同樣模擬條件下，穩(wěn)定性越差。 相比原液，均質(zhì)1.5h后樣品穩(wěn)定性指紋圖譜，透光率變化更小，穩(wěn)定性更好。

4.  總結(jié)

使用意大利PSI微射流均質(zhì)機(jī)對(duì)混懸劑團(tuán)聚體進(jìn)行破碎，混懸劑的尾端大顆粒有明顯的去除，并且獲得了粒徑更小、均一性更好的樣品，同時(shí)也提高了混懸劑的穩(wěn)定性。意大利PSI微射流均質(zhì)搭配美國(guó)PSS粒度儀和德國(guó)LUM穩(wěn)定性分析儀，可為混懸劑的研發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制提供整套解決方案。